近年来，肿瘤免疫治疗已经展现了独树一帜的运用价值和运用前景，以免疫靶向点治疗、“过继性免疫治疗”、肿瘤疫苗等为首的免疫治疗迅速进步并获得一定临床效果，是目前研究的一大热点。γδT 细胞自发现以来，一度被研究学者忽视，甚至被认为是进化史上的" 残留物"。随着研究学者的深入研究，人们发现虽然 γδT 细胞在外周血中的含量少，但其功能广泛且全面，在免疫治疗方面更是突出，尤其在肿瘤免疫、感染免疫、自身免疫功能调节、修复损伤等方面的功能及临床治疗价值更是重要。

γδT --- 低调而有内涵的免疫细胞

根据T细胞受体（TCR）表达的不同，可将T细胞分为2个主要的细胞亚群，即αβT细胞和γδT细胞。人外周血淋巴细胞以αβ T细胞为主，γδ T细胞一般只占0.5%-5%。1986 年，γδT 细胞被首次发现，由于γδT细胞是外周血当中相对罕见的细胞群体，科学界对其关注甚微，其研究较其他免疫细胞相对滞后。直至21世纪初，γδ T细胞的抗肿瘤特性在小鼠身上得以确认。近几年随着研究的深入，曾一度被人们忽视的 γδT 细胞重新加入了免疫治疗的行列。因其具有先天性免疫和获得性免疫的双重优点，以 γδT 细胞为基础的治疗在感染控制、炎症免疫调节方面具有独特优势。

免疫细胞先锋战士，细胞治疗超新星

γδT细胞自发现至今已有30余年，它可以识别独立于MHC识别的抗原，而不需要嵌合抗原受体，可以避免产生GvHD效应，已成为各种癌症免疫治疗方法中备受关注的候选者。由于γδT 细胞在人体内存在量较少，且未被活化，目前γδ T细胞疗法以过继细胞疗法和特异性CAR-γδT为主。

首个使用修饰γδT细胞（CAR-T）的临床试验于2016年在中国公布，并于2017年在中国开始，自此，γδT细胞临床试验的数量急剧增加。截至2022年11月，至少有48项γδT细胞相关临床试验在Clinical Trials上注册。

其中，国外企业研发进展较快，已注册的γδ T疗法临床试验主要集中在I期阶段，IN8bio开发的同种异体γ-δT细胞疗法INB-200已取得I期积极数据；国内方面，也有传奇生物、药明巨诺等多家企业布局γδT细胞疗法，其中瑞创生物RC1012（DNT细胞疗法）已进入I期临床；药明巨诺的一款GPC3 CAR-T则采取了优瑞科的γδTCR，目前也在I期临床，其它多数则尚处于临床前研发阶段。目前，针对γδT细胞已经建立大量的临床肿瘤模型，不断推进γδT细胞研究的发展，γδT细胞在未来癌症疗法中的重要地位已成定局。

γδ T 细胞疗法目前面临的挑战，包括扩增出临床可用的细胞量和保证临床疗效。传统的体外扩增方法，如膦酸盐或有丝分裂剂，仍不是最理想的，只能扩增少数 γδ T 细胞亚群，因此，在细胞疗法中，运用临床成熟的，高效的，安全性高的体外扩增方法获得标准型的 γδT 细胞已经成为目前治疗恶性肿瘤的必经之路，进一步构建有效的、安全性高的 γδＴ细胞体外扩增体系则是亟待解决的问题。

γδ T标本采集及检测的注意事项

1. 建议直接使用淋巴细胞分离液分离外周血PBMC检测γδT细胞；
   
2. 外周血采集后需在2小时内进行PBMC分离，随着时间延长，PBMC分离数量及活性可能会下降，并影响γδT细胞的诱导扩增，超过2小时建议延长离心时间至30min；
   
3. 保证血液标本的保存运输过程中2-8℃温度的稳定；
   
4. 脐血来源的CBMC，应使用高效样本密度分离液(货号：CS006)，尽量避免红细胞的残留，分离出高质量CBMC单个核细胞；
   
5. 流式检测时可使用PE荧光素标记CD3抗体和FITC荧光素标记γδT抗体，检测时先通过FSC-SSC散点图圈出淋巴细胞群后，再分析CD3+γδT+表达情况。
   
6. 流式检测应尽量在4小时内完成，外送检测时细胞如不能及时处理将导致细胞表面标记变化，可能会影响γδT细胞表型的检测准确性。
   

γδ T细胞培养小技巧